荆门隔热条PA66 基于Alexa Fluor 594的东说念主清白卵白（Alexa Fluor 594 Human Serum Albumin）符号探针：光谱行径与牢固

、基本信息荆门隔热条PA66

AF594 HSA，即Alexa Fluor 594符号东说念主清白卵白（Alexa Fluor 594 Human Serum Albumin），又称为AF594 Human Serum Albumin、Alexa Fluor594 HSA、AF594符号东说念主清白卵白、Human Serum Albumin, Alexa Fluor 594 labeled。该产物是将纯度的东说念主清白卵白（HSA）通过共价偶联的式与Alexa Fluor 594荧光染料结而成的荧光符号卵白偶联物。产物时常以冻干粉或溶液格式供应，便于执行室胜利使用或长期保存。

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二、染料特——Alexa Fluor 594

1. 光谱特

大引发波长：约590 nm大放射波长：约617 nm消光扫数：约90,000 cm⁻¹M⁻¹荧光量子产率，在生理pH条款下荧光信号牢固，不易淬灭

2. 染料势

光牢固异，比较传统荧光染料（如TRITC、CY3等），抗光漂白才能权贵增强，适永劫辰荧光不雅察和成像荧光强度，智慧度出对pH变化不解锐，在pH 4～10范围内荧光能保合手牢固水溶好，偶联后不易产生连合千里淀引发/放射光谱与常见的FITC、DAPI、Alexa Fluor 488等染料有致密的光谱划分度，便于多荧光执行筹谋

3. 光谱兼容

AF594的光谱位置处于红橙光区域，可与蓝绿光通说念的荧光染料（如FITC、Alexa Fluor 488）以及远红光通说念的染料（如Alexa Fluor 647、Alexa Fluor 750）配使用，达成多通说念荧光符号和共定位分析。

三、载体卵白特——东说念主清白卵白（HSA）

1. HSA基本属

分子量：约66.5 kDa等电点：约4.7（酸卵白）结构：单链多肽，由585个氨基酸残基构成，含有17对二硫键，变有意形三维结构起原：从健康东说念主浆中提真金不怕火纯化，经过严格的病毒灭活和去热原惩办

2. HSA当作符号录体的势

生物相容佳：HSA是东说念主体内含量丰富的浆卵白（宽泛浓度约35～50 g/L），在体内世俗存在，疫原低，不易引起非特异疫响应牢固好：HSA在多种缓冲液体系中均保合手致密的溶化和结构牢固，耐受温度变化和冻融轮回结才能强：HSA具有多个配体结位点（如Sudlow I位和Sudlow II位），可结脂肪酸、药物分子、金属离子等多种小分子，常被用作药物寄递计划中的模子载体卵白半衰期长：HSA在液轮回中的半衰期约为19天，是药物寄递系统计划中理念念的长轮回载体模子易于修饰：HSA名义含有约35个赖氨酸残基和1个游离巯基（Cys34），提供了丰富的偶联位点，便于荧光染料、靶向配体、分子聚物等的共价连结

四、AF594 HSA的制备工艺

1. 偶联化学

AF594 HSA时常领受NHS酯化学进行偶联。Alexa Fluor 594 NHS酯（N-羟基琥珀酰亚胺酯）与HSA名义的伯胺基团（主若是赖氨酸ε-氨基）在弱碱条款下（pH 8.0～8.5）发生亲核取代响应，变成牢固的酰胺键。

2. 符号比率（DOL, Degree of Labeling）

常见的符号比率为每分子HSA偶联3～8个AF594染料分子符号比率过可能致卵白连合或荧光淬灭（自淬灭应）符号比率过低则荧光信号不及质产物会经过严格的DOL测定和质控，确保批间致

3. 纯化工艺

偶联响应后通过凝胶过滤层析（如Sephadex G-25或G-50柱）去除未响应的游离染料同期进行滤浓缩和煦冲液交换，将产物置换至适储存的缓冲液中（时常为PBS，pH 7.4，含0.02 NaN₃当作腐剂）终产物经过SDS-PAGE考据、UV-Vis光谱说明和荧光光谱检测等多重质控

五、产物规格与储存条款荆门隔热条PA66

外不雅红至橙红冻干粉或溶液

浓度时常为1 mg/mL～10 mg/mL（以卵白浓度计）

缓冲液PBS (pH 7.4)，或把柄客户需求定制

腐剂0.02～0.05 NaN₃（溶液格式）

储存温度-20°C避光保存（冻干粉可在-20°C保存12个月以上；溶液残酷分装后-20°C保存，避反复冻融）

避光要求全程避光操作和储存，止荧光染料光降解有期冻干粉时常12～24个月；溶液格式6～12个月

六、主要应用域

1. 荧光示踪与药代能源学计划

AF594 HSA可当作模子荧光符号卵白，用于计划卵白质在体表里的漫衍、转运和断根经由。由于HSA自己具有长轮回特，AF594 HSA常被用作评估纳米载体、脂质体、微球等药物寄递系统体内轮回时辰和生物漫衍的圭臬参照物。

2. 细胞吸收与内吞机制计划

垄断AF594的红橙荧光，可在荧显豁微镜、激光共聚焦显微镜或流式细胞仪上跟踪HSA被细胞吸收的经由。常用于计划网格卵白介的内吞、小窝卵白介的内吞、巨胞饮等不同内吞门道，以及内体/溶酶体逃跑等细胞生物学经由。

3. 管通透与渗漏计划

AF594 HSA分子量较大（66.5 kDa），宽泛情况下不易穿过完好意思的管内皮樊篱。通过检测组织中AF594荧光信号的外渗进程，塑料管材设备可评估管通透的变化，世俗应用于症模子、组织挫伤诞生、微轮回阻拦等基础计划域。

4. 卵白质互相作用与结计划

垄断荧光偏振（FP）或荧光共振能量升沉（FRET）技巧，AF594 HSA可用于计划HSA与小分子配体（如脂肪酸、药物分子、金属离子）之间的联婚和力和结能源学，是药物-卵白互相作用筛选的关键用具。

5. 荧光圭臬品与仪器校准

AF594 HSA可当作荧光强度圭臬品，用于荧光光谱仪、酶标仪、流式细胞仪、荧显豁微镜等仪器的校准和能考据，确保执行数据的可访佛和可比。

6. 体外会诊与疫分析

在ELISA、疫荧光、Western Blot、疫组化等疫分析技巧中，AF594符号的HSA可当作二抗偶联物或信号放大试剂，提供智慧度的红橙光通说念检测信号。

7. 微流控与芯片执行室计划

AF594 HSA在微流控芯片中可当作示踪分子，用于计划微通说念内的流体能源学、卵白质吸附行径、名义修饰果等，是微流控技巧蛊惑和化的关键用具试剂。

8. 组织工程与生物材料计划

将AF594 HSA负载于水凝胶、支架材料、3D印生物材料中，可通过荧光成像及时监测卵白的开释能源学和材料的降解行径，指生物材料的筹谋和化。

七、执行操作翔实事项

避光操作：从取坐褥物到完成执行，全程应在避光或弱光条款下进行，使用不透明容器或锡箔包裹避反复冻融：溶液格式的AF594 HSA应分装成单次使用量，每次取用份，避反复冻融致卵白变和荧光衰减浓度截止：使用时翔实卵白浓度不宜过（般残酷1～100 μg/mL），避荧光自淬灭对照诞生：执行中应诞生未符号HSA的阴对照和已知浓度AF594圭臬品的阳对照缓冲液聘任：避使用含伯胺的缓冲液（如Tris），因为Tris会与NHS酯响应，影响偶联率或致染料水解；荐使用PBS、HEPES等不含伯胺的缓冲液仪器诞生：使用流式细胞仪时，引发光可采用561 nm或594 nm激光辉，检测通说念诞生为610/20 nm或620/30 nm带通滤光片

八、与其他荧光符号HSA的比较

染料引发波长(nm)放射波长(nm)特质FITC495519绿光，光谱划分度般，光牢固较差Alexa Fluor 488495519绿光，光牢固于FITCAF555555565橙光，适与GFP配AF594590617红橙光，光牢固异，光谱划分度好Alexa Fluor 647650668远红光，适层组织成像Cy5649670远红光，但光牢固不如Alexa Fluor系列

AF594在红橙光区域具有佳的光牢固和光谱兼容，是多荧光执行中异常理念念的聘任。

九、质料截止方针

卵白浓度：BCA法或Bradford法测定，准确度±10符号比率（DOL）：UV-Vis分光光度法测定（A590/A280比值法），典型值3～6游离染料含量：<5（通过凝胶过滤或滤测定）纯度：SDS-PAGE分析，主带纯度≥90荧光特：引发/放射光谱与圭臬品致，荧光强度达标内毒素：<1 EU/μg卵白（LAL法）菌检测：细菌、真菌、支原体检测阴

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AF488符号东说念主清白卵白（AF488 HSA）AF647符号东说念主清白卵白（AF647 HSA）FITC符号东说念主清白卵白（FITC-HSA）Cy5符号东说念主清白卵白（Cy5-HSA）Cy7符号东说念主清白卵白（Cy7-HSA）生物素符号东说念主清白卵白（Biotin-HSA）Digoxigenin符号东说念主清白卵白（DIG-HSA）荧光素符号牛清白卵白（FITC-BSA）荧光素符号卵清卵白（FITC-OVA）AF594符号转铁卵白（AF594-Transferrin）AF594符号IgG抗体（AF594-IgG）AF594符号链霉亲和素（AF594-Streptavidin）AF594符号葡聚糖（AF594-Dextran）AF594符号卵清卵白（AF594-OVA）Alexa Fluor 594 NHS酯（游离染料，用于自主偶联）

以上由陕西新研博好意思生物WWH提供的试剂信息，仅供科研机构、校执行室及企业研发部门用于非临床主意的科学计划、体外执行或分析检测。

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